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杭州市呼吸道合胞病毒引起幼儿园急性呼吸道感染暴发疫情调查

杨旭辉 于新芬 张晨烨 王芬 朱雷 蒋龙芳 王婧 刘牧文

杨旭辉, 于新芬, 张晨烨, 王芬, 朱雷, 蒋龙芳, 王婧, 刘牧文. 杭州市呼吸道合胞病毒引起幼儿园急性呼吸道感染暴发疫情调查[J]. 中国学校卫生, 2022, 43(1): 142-145. doi: 10.16835/j.cnki.1000-9817.2022.01.032
引用本文: 杨旭辉, 于新芬, 张晨烨, 王芬, 朱雷, 蒋龙芳, 王婧, 刘牧文. 杭州市呼吸道合胞病毒引起幼儿园急性呼吸道感染暴发疫情调查[J]. 中国学校卫生, 2022, 43(1): 142-145. doi: 10.16835/j.cnki.1000-9817.2022.01.032
YANG Xuhui, YU Xinfen, ZHANG Chenye, WANG Fen, ZHU Lei, JIANG Longfang, WANG Jing, LIU Muwen. Investigation on outbreaks of acute respiratory tract infection caused by respiratory syncytial virus in kindergartens in Hangzhou[J]. CHINESE JOURNAL OF SCHOOL HEALTH, 2022, 43(1): 142-145. doi: 10.16835/j.cnki.1000-9817.2022.01.032
Citation: YANG Xuhui, YU Xinfen, ZHANG Chenye, WANG Fen, ZHU Lei, JIANG Longfang, WANG Jing, LIU Muwen. Investigation on outbreaks of acute respiratory tract infection caused by respiratory syncytial virus in kindergartens in Hangzhou[J]. CHINESE JOURNAL OF SCHOOL HEALTH, 2022, 43(1): 142-145. doi: 10.16835/j.cnki.1000-9817.2022.01.032

杭州市呼吸道合胞病毒引起幼儿园急性呼吸道感染暴发疫情调查

doi: 10.16835/j.cnki.1000-9817.2022.01.032
基金项目: 

杭州市医药卫生科技项目 A20200591

详细信息
    作者简介:

    杨旭辉(1980-),女,河南省人,硕士,副主任医师,主要从事呼吸道传染病防控工作

  • 利益冲突声明  所有作者声明无利益冲突。
  • 中图分类号: R183 R181.3 R725.1

Investigation on outbreaks of acute respiratory tract infection caused by respiratory syncytial virus in kindergartens in Hangzhou

  • 摘要:   目的  分析呼吸道合胞病毒感染引起的儿童急性呼吸道感染暴发疫情的特点,并对防控工作予以总结和评价,为集体单位呼吸道感染暴发疫情防控提供依据。  方法  采用现场流行病学调查的方法对杭州市两起疫情进行调查,采用描述流行病学的方法对资料进行分析; 采用PCR方法对标本进行检测,并对呼吸道合胞病毒核酸阳性的标本进行测序。  结果  两起疫情均发生在幼儿园,A幼儿园发病21例,持续11 d,B幼儿园发病43例,持续33 d,流行曲线呈现增殖模式。病例集中在托班和小班,年龄2~4岁为主。症状以发热、咳嗽为主,主要为上呼吸道感染,未发现重症病例。采集病例上呼吸道标本检测,为呼吸道合胞病毒阳性,对4份标本进行测序,为B亚群。  结论  幼儿园急性呼吸道感染暴发时要考虑呼吸道合胞病毒,注意与其他呼吸道感染引起的暴发疫情的鉴别,控制措施要严格,避免疫情长久持续。
    1)  利益冲突声明  所有作者声明无利益冲突。
  • 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)属于副黏病毒科肺病毒属,是儿童呼吸道感染的最常见病原体之一,可侵犯上下呼吸道,由RSV感染导致的急性上呼吸道感染常见于年长儿童; 而RSV感染引发肺炎和毛细支气管炎,常见于2岁以下儿童,幼儿感染RSV后可能会引起反复发作的喘息和哮喘等后遗症[1-4]。目前尚缺乏有效的疫苗,所以RSV感染并无特异性预防措施。社区人群中RSV感染通常以散发和家庭聚集为主,但集体单位内也可出现暴发,以院内感染导致的暴发疫情报道较多,幼儿园、学校等集体单位RSV感染导致的暴发疫情报道较少[1, 5-6]。2020年下半年,分别接到2起幼儿园呼吸道感染暴发疫情的报告,经过现场调查和病原学检测,最终确定为RSV引起的呼吸道感染暴发疫情,故本研究旨在通过对2起暴发疫情的现场流行病学调查结果进行分析和总结,描述RSV在集体单位内暴发的特征,评估应急干预措施效果,为集体单位呼吸道感染暴发疫情防控提供依据。

    现场调查时,对病例进行追溯,A幼儿园病例搜索开始时间为2020年10月25日,B幼儿园病例搜索开始时间为2020年11月24日。以幼儿园及教职员工中出现发热、咳嗽、咽痛等呼吸道症状者为研究对象; 符合以上病例定义者,如采集咽拭子标本并检出RSV核酸阳性者则为确诊病例。

    采用统一调查一览表对研究对象开展调查,采取查阅因病缺勤记录、询问班主任和家长的方式进行调查。对调查当日在校的学生采取询问班主任的方式,收集近期是否有过发热、咳嗽等情况并予以记录; 对于调查当日请假的学生,采用电话调查的方式,询问其家长该学生近期是否有发病、就诊等情况,并记录发病日期、病程持续时间、曾出现的症状、就诊信息、检查结果等。

    采集现症病例咽拭子标本并检测。检测方法如下:(1)RSV核酸提取。使用QIAGEN DNA mini kit试剂盒提取病原体DNA,使用QIAGEN RNeasy mini kit(74104)提取病毒RNA,实验操作步骤严格按说明进行,最后将核酸溶解于50 μL ddH2O中。(2)逆转录。使用PrimeScript Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit(Takara)进行反转录反应,反应体系包括1 μL 50ng/μL的6-per随机引物、1 μL dNTP(10 mM each)、8 μL提取的RNA,混匀置65 ℃ 5 min,冰上迅速冷却,再加入反应液[4 μL 5×PrimeScript Ⅱ Buffer,0.5 μL Rnase Inhibitor(40 U/μL),1 μL PrimeScript II Rtase(200 U/μL),ddH2O 4.5 μL],30 ℃ 10 min,42 ℃ 60 min进行反转录反应,70 ℃ 15 min灭活酶,置冰上冷却,cDNA保存于-40 ℃冰箱。(3)实时PCR检测。选取核酸检测阳性样本使用普通PCR扩增RSV HRV2区[7],RSV阳性的PCR产物送至上海生工生物工程有限公司测序,参考株序列从GenBank下载。

    采用Excel 2010进行描述性统计分析并绘制流行曲线。用软件ClustalX 1.81进行核苷酸和氨基酸序列一致性比对,然后使用MEGA 6.0软件,采用Neighbor-joining方法,用Bootstrap程序进行500次重复计算建立系统进化树。

    2起疫情均发生在托幼机构,分布在不同区,但均位于主城区,其中A为民办幼儿园,B为公办幼儿园。A幼儿园设有4个年级8个班(托班1个、小班3个、中班3个、大班1个)。幼儿园环境、教室通风良好,面积约有150 m2,配有独立洗手间,教室内用餐和午休。每个班级配备3名教师和1名生活教师。

    B幼儿园发生疫情的为该幼儿园娃娃部,为独立园区,未和幼儿园其他年级共用校园,校舍卫生条件、教室通风良好,但午休区域较为拥挤,通风不佳。该校区设有8个班级,每班配备3名教师。

    2所幼儿园共搜索到病例64例,其中A幼儿园21例,以托班为主(16例),其余5例病例分散在1个小班和2个中班; B幼儿园43例,分布在7个班级,均为小班。

    2起疫情中病例的主要症状均为发热(96.88%,62例)、咳嗽(84.38%,54例),其余症状有卡他症状(10.94%,7例)、扁桃体炎(10.94%,7例)、咽痛(4.69%,3例)、头痛(1.56%,1例)等。A幼儿园患儿诊断主要为上呼吸道感染(发热20例,咳嗽18例,咽痛1例,扁桃体发炎5例,头痛1例),均为门诊治疗和居家休息,无重症、无住院患儿; B幼儿园有5名幼儿诊断为肺炎,6名诊断为支气管炎,其余就诊幼儿以急性上呼吸道感染为主,除1名肺炎患儿住院治疗外,其余均门诊治疗和居家休息,无重症患儿。2起疫情中上呼吸道感染所占的比例为82.81%(53例),下呼吸道感染所占的比例为17.19%(11例)。

    A幼儿园首发病例为2岁,于2020年11月1日发病,以高热、扁桃体发炎为主要表现,就诊时诊断为细菌性感染; B幼儿园首发病例为4岁,12月1日发病,以高热、咳嗽为主要症状,就诊时诊断为肺炎。

    2.3.1   时间分布

    图 1~2可以看出,流行曲线呈现增殖模式。A幼儿园的暴发疫情始于11月1日,6和8日为峰值,疫情持续11 d; B幼儿园疫情始于12月1日,21日为峰值,疫情持续33 d。

    图  1  A幼儿园RSV暴发疫情流行情况
    Figure  1.  Epidemic curve of RSV outbreak in A kindergarten
    图  2  B幼儿园RSV暴发疫情流行情况
    Figure  2.  Epidemic curve of RSV outbreak in B kindergarten
    2.3.2   空间分布

    A幼儿园病例主要发生在托班(16例),托班教室单独位于一楼,不与其他班级相混。B幼儿园病例分布在7个班级,发病最多的班级为11例,其次为9例,再次为7例。最早发病的9例均集中在同一班级,之后逐步扩散到其他班级。

    2.3.3   人群分布

    A幼儿园21例病例中,20例为园内就读幼儿,1例为教师; B幼儿园病例均为园内就读幼儿。A幼儿园患儿年龄均集中在2~3岁,B幼儿园患儿年龄集中在3~4岁。A幼儿园男、女患儿分别为10和11例,性别比为0.91∶1;B幼儿园男、女患儿分别为18和25例,性别比为0.72∶1。

    在A幼儿园现症病例中采集10份咽拭子标本,经检测,4份标本为RSV核酸阳性,1份为腺病毒阳性,5份为阴性; 现场采集B幼儿园现症病例咽拭子标本8份,检出6份RSV核酸阳性(其中1份标本检出RSV和腺病毒核酸共同阳性,1份标本检出副流感4共同阳性,1份标本检出偏肺病毒、人鼻病毒共同阳性),1份为腺病毒核酸阳性。

    对4份RSV核酸阳性的标本进行扩增并测序,将测序得到的HRV2与GenBank中下载的参考序列进行比对和进化树分析,4株毒株均为RSV B亚群病毒,其HRV2核酸和氨基酸序列一致性均为100%。

    在2起疫情的处置中,首先考虑了流行性感冒,在经过实验室检测排除后,根据发病年龄段及主要临床表现,重点考虑可能为RSV和腺病毒感染引起暴发; 而在对B幼儿园的处置中,根据发热、咳嗽为主的临床症状、疫情持续时间较长、流行曲线以及季节性,也考虑了肺炎支原体引起的暴发,最终通过实验室检测予以排除。

    A幼儿园在发现疫情后,立即采取托班停课4 d,全校加强晨、午检,病例需隔离至体温正常、症状消失48 h后方能返园,加强消毒、通风等措施之后,疫情迅速得到控制,未造成园内更大规模播散。B幼儿园在疫情早、中期,尚局限于个别班级时,仅采取隔离病例,通风消毒等措施,并未采取班级停课措施,至疫情播散之后,才采取对发病数多的班级停课等更为严格的措施,效果已较差,疫情回落较为缓慢,持续时间较久,波及班级多。

    杭州市流感样病例暴发疫情监测中发现2起RSV所致的急性呼吸道感染暴发疫情,均发生在幼儿园,且主要发生在托班和小班,年龄集中在2~4岁,以发热和咳嗽为最主要的临床表现,另有扁桃体炎、头痛、咽痛等症状者。以上呼吸道感染为主,也有少数患儿出现下呼吸道感染,但未出现重症病例,与以往的研究相符[1, 5, 8]。RSV可通过咳嗽和打喷嚏传播,也可通过间接接触传播,如接触被RSV污染的物体表面而获得感染,与流感、腺病毒等呼吸道感染的传播途径相似。分析2起疫情的传播途径,经呼吸道传播和接触传播均存在可能。A幼儿园疫情主要发生在托班,上课、游戏、吃饭、午休均在教室内,幼儿互相间接触频繁,首发病例在发病前曾与咳嗽儿童有过密切接触,且在未痊愈时即返园; 此外该校在2020年10月28日举办过全校的游园活动,班级之间也会互相交叉。B幼儿园园区均为小班幼儿,学习、游戏、午餐、盥洗等场所为班级单独使用,班级内幼儿接触频繁,尤其午休场所较为拥挤,通风不佳,午休时幼儿铺位间距较小。除班级内活动外,园内有集体活动时班级之间也有交叉。从2起暴发疫情的模式看,也与其他呼吸道传染病相仿,以局部小暴发为主,如果控制措施不力则可能会蔓延[9-10]。2起疫情中A疫情幼儿园在发现之后果断采取停课措施,未造园内的播散,而B幼儿园实施停课措施时,疫情已播散至多个班级,最终疫情规模大,持续时间久。

    RSV流行具有季节性,不同纬度地区高发季节不尽相同,在北半球多表现为秋冬季高峰,而热带国家多在雨季高发[1, 4, 11]。Feng等[12]于2009—2013年在我国22个省开展研究发现,RSV感染的高峰出现在每年1—2月。此外,浙江台州、武汉、西安、河北等地的研究也发现RSV高峰多出现在冬季,而广东的研究发现除了冬季高峰外,夏季也有小高峰[13-17]。本文所讨论的2起疫情均发生在2020年秋冬季,与既往研究中北半球RSV流行季节相符,但杭州市RSV暴发疫情的季节特征尚需更多监测。

    在B幼儿园疫情中,观察到RSV与腺病毒、人鼻病毒、人偏肺病毒和副流感病毒4共同感染的现象。在既往的研究中,门诊或住院的急性呼吸道感染病例,均有共同感染现象的报道[18-19]。而在暴发疫情中,关于共同感染情况报道的较少,可能与既往多重检测开展较少有关,随着暴发疫情多重检测的开展,可能会观察到更多的共同感染现象。

    RSV分为A和B两个亚群,不同亚型与疾病严重程度的关系目前仍存在争议,通常认为感染A亚群引起的疾病比B亚群严重[1]。疫情中对4份标本进行分型,为B亚群,发病幼儿也以上呼吸道感染为主,未发现重症病例。A与B两个亚群的流行模型也不尽一致,有研究观察到两个亚群交替流行,也有研究发现是共同流行,但以某个亚群为主[3]。目前对于暴发疫情中RSV亚群的流行特征研究相较少,所以有待更多的监测数据支持。

    综上所述,在秋冬及冬春季,托幼机构和学校,尤其是托幼机构发生急性呼吸道感染的暴发疫情时,应考虑到RSV感染。本研究不足之处为未能获取暴发疫情中表现为下呼吸道感染的病例的详细诊疗情况,所以未对此开展分析。此外,未能采集到未发病班级的幼儿和无症状幼儿的咽拭子标本,无法观察疫情中是否存在隐性感染的情况。

  • 图  1  A幼儿园RSV暴发疫情流行情况

    Figure  1.  Epidemic curve of RSV outbreak in A kindergarten

    图  2  B幼儿园RSV暴发疫情流行情况

    Figure  2.  Epidemic curve of RSV outbreak in B kindergarten

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出版历程
  • 收稿日期:  2021-07-07
  • 修回日期:  2021-08-17
  • 刊出日期:  2022-01-25

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